ESTRUCTURA Y FUNCION DE ASPARTATO AMINOTRANSFERASA MITOCONDRIAL: EFECTO DE MUTAGENESIS SITIO DIRIGIDA SOBRE SU ESTABILIDAD, PLEGAMIENTO E IMPORTACION A LA MATRIZ MITOCONDRIAL.
Autor ALEJANDRO JAVIER YAÑEZ CARCAMO
Profesor guía JUAN CARLOS SLEBE TAJMUCH
Para optar al grado de DOCTOR EN CIENCIAS CON MENCION EN BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR. Institución UNIVERSIDAD AUSTRAL DE CHILE. FACULTAD DE CIENCIAS.
Lugar VALDIVIA, CHILE Año 1997
Páginas 177p.
Disciplina CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES; BIOLOGIA; BIOLOGIA MOLECULAR; BIOLOGIA CELULAR. Colección TESIS
Ubicación TESIS/0281D
Resumen
LA ISOENZIMA MITOCONDRIAL ASPARTATO AMINOTRANSFERASA (MASPAT) ES UNA ENZIMA DIMERICA DEPENDIENTE DE PIRIDOXAL FOSFATO. ESTA ENZIMA QUE ES SINTETIZADA EN EL CITOPLASMA SE ENCUENTRA CODIFICADA EN EL GENOMA NUCLEAR EN FORMA DE PRECURSOR MITOCONDRIAL (PMASPAT). ESTE PRECURSOR, DE HIGADO DE RATA, CONTIENE UNA SECUENCIA SEÑAL DE 29 AMINOACIDOS EN LA REGION AMINO TERMINAL, PRESECUENCIA QUE ES ESENCIAL PARA SU ENVIO Y TRANSLOCACION A LA MATRIZ MITOCONDRIAL. INCUBACIONES PROLONGADAS DEL PMASPAT RECIEN SINTETIZADO EN UN AMBIENTE CITOSOLICO COMO ES EL LISADO DE RETICULOCITOS DE CONEJO (RRL), HAN MOSTRADO QUE ESTA PROTEINA ADQUIERE LENTAMENTE EN EL TIEMPO LA RESISTENCIA A LA HIDROLISIS POR TRIPSINA, PROPIEDAD CARACTERISTICA DE LA PROTEINA PLEGADA ACTIVA. ADEMAS, SE OBSERVO QUE AL FINAL DE ESTA INCUBACION ESTA PROTEINA ES CAPAZ DE UNIR PIRIDOXAL FOSFATO (PLP), TIENE ACTIVIDAD CATALITICA Y PIERDE LA CAPACIDAD DE SER IMPORTADA A LA MATRIZ MITOCONDRIAL. ESTOS RESULTADOS SUGIEREN QUE EL PROCESO QUE SE ESTAñoBSERVANDO ES EL DEL PLEGAMIENTO DE PMASPAT RECIEN SINTETIZADO EN LISADO DE RETICULOCITOS. LA ADICION DE COFACTOR Y LA CONCENTRACION DEL MATERIAL SINTETIZADO EN RRL NO AFECTA LA TASA DE PLEGAMIENTO DEL PRECURSOR. SIN EMBARGO, ESTE PROCESO RESULTO SER DEPENDIENTE DE LA TEMPERATURA DE ATP. ESTOS RESULTADOS SON PRESENTADOS COMO UN MODELO DE ESTUDIO IN VITRO MAS CERCANO A LAS CONDICIONES IN VIVO DEL PLEGAMIENTO DE PROTEINAS MITOCONDRIALES OLIGOMERICAS EN LA PRESENCIA DE COMPONENTES CITOPLASMATICOS CELULARES.