SEPARACION, PURIFICACION Y CARACTERIZACION DE PROTEASAS CRIOFILICAS DE EUPHAUSIA SUPERBA.
Autor	MAURICIO HUMBERTO SALAMANCA ZAMORA
Profesor guía	BARBARA ANDREWS FARROW
Para optar al grado de	DOCTOR	Institución	UNIVERSIDAD DE CHILE. FACULTAD DE CIENCIAS FISICAS Y MATEMATICAS. DEPARTAMENTO DE INGENIERIA QUIMICA.
Lugar	SANTIAGO, CHILE	Año	2002
Páginas	144p.
Disciplina	CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES; QUIMICA.	Colección	TESIS
Ubicación	TESIS/0290D
Resumen
SE INVESTIGO LAS PROPIEDADES Y ESTRUCTURALES DE LAS PROTEASAS DE TIPO TRIPSINA PERTENECIENTES A EUPHAUSIA SUPERBA. COMO PRIMER PASO SE ELABORO UN PROCEDIMIENTO QUE PERMITIERA SU SEPARACION DESDE EL KRILL Y SU POSTERIOR PURIFICACION. LA SEPARACION DE LAS PROTEASAS DESE EL KRILL SE LLEVO A CABO MEDIANTE UN PROCESO DE AUTOLISIS CONTROLADA (48 H Y 20�C). LA PURIFICACION SE LOGRO MEDIANTE UNA CROMATOGRAFIA DE INTERCAMBIO IONICO EN Q-SEPHAROSE FF DONDE SE AISLARON CUATRO ACTIVIDADES DE PROTEASAS TIPO TRIPSINA EN CUATRO FRACCIONES O "POOLES" DISTINTOS. DADO EL ALTO CONTENIDO DE PROTEINAS CONTAMINANTES, ESTAS FRACCIONES SE PREOCESARON EN FORMA INDEPENDIENTE. LA SEGUNDA ETAPA DE PURIFICACION DE CADA FRACCION SE LLEVO A CABO MEDIANTE UN CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD DE BENZAMIDINA SEPHAROSE 6B. A TRAVES DE ESTE PROCEDIMIENTO SE PUDO AISLAR LAS CUATRO PROTEASAS BUSCADAS Y SE DETERMINO QUE LA PROTEASA DEL POOL I TIENE UNA MASA MOLECULAR DE 31 KDA Y UN PUNTO ISOELECTRICO DE 4.1. LA PROTEASA DEL POOL II TIENE UNA MASA MOLECULAR DE 29 KDA Y UN PUNTO ISOELECTRICO QUE SE ENCUENTRA ENTRE 3, 6 Y 4. LAS PROTEASAS DE LOS MOLECULARES Y PUNTOS ISOELECTRICOS (17 KDA Y 3.6 APROXIMADAMENTE).