LOS CANALES TIPO SHAKER SON PROTEINAS TRANSMEMBRANALES QUE TRANSPORTAN DE UN MANERA RAPIDA LOS IONES POTASIO (K+) EN LOS TEJIDOS VEGETALES. LOS CANALES TIPO SHAKER DE PLANTAS ESTAN DIVIDIDOS EN DOS GRANDES GRUPOS DE ACUERDO A SU MECANISMO DE ACTIVACION MEDIADO POR VOLTAJE: I) LOS CANALES DE RECTIFICACION DE ENTRADA (KIN), QUE SE ACTIVAN POR HIPERPOLARIZACION DE LA MEMBRANA Y TRANSPORTAN K+ HACIA DENTRO DE LA CELULA. II) LOS CANALES RECTIFICADORES DE SALIDA (KOUT), QUE SE ACTIVAN POR DESPOLARIZACION DE LA MEMBRANA Y TRANSPORTAN K+ HACIA EL APOPLASMA. EL CANAL KAT1 QUE TRANSPORTA K+ HACIA EL CITOPLASMA DE LAS CELUAS GUARDIANAS EN ARABIDOPSIS THALIANA PERTENECE AL GRUPO 1. EL CANAL SKOR QUE DESCARGA K+ DESDE LA RAIZ HACIA EL XILEMA EN A. THALIANA PERTENECE AL GRUPO II. A TRAVES DE METODOS DE BIOINFORMATICA ESTRUCTURAL SE COMPARARON LOS CANALES KAT1 Y SKOR CON EL FIN DE IDENTIFICAR LOS AMINOACIDOS QUE CONFIEREN DIVERSIDAD FUNCIONAL ENTRE LOS CANALES KIN Y KOUT. SE DETERMINO QUE RESIDUOS EMPLAZADOS EN EL EXTREMO N-TERMINAL DEL SEGMENTO TRANSMEMBRANAL S5 Y RESIDUOS DEL SEGMENTO TRANSMEMBRANAL S6, ESTAN RELACIONADOS CON LAS DIFERENCIAS EN EL MECANISMO DE ACTIVACION MEDIADO POR VOLTAJE ENTRE LOS CANALES KIN Y KOUT. ADEMAS, SE DESCRIBIO COMO LOS RESIDUOS D312, M313 E I314 EN SKOR SON LOS RESPONSABLES DE LA ACTIVACION DE ESTE CANAL KOUT POR LA CONCENTRACION EXTRACELULAR DE K+, MECANISMO DE ACTIVACION QUE NO ESTA PRESENTE EN LOS CANALES KIN. LAS DIFERENCIAS EN LOS MECANISMOS DE ACTIVACION TAMBIEN SE REFLEJAN EN LA ACTIVACION MEDIADA POR EL PH DEL MEDIO. LOS CANALES KIN SE ACTIVAN POR UNA ACIDIFICACION DEL APOPLASMA PERO LOS RESIDUOS QUE SENSAN ESTA VARIACION DE LA CONCENTRACION EXTRACELULAR DE PROTONES (HEXT) NO ESTAN CONSERVADOS ENTRE LOS CANALES KIN. A TRAVES DE MUTAGENESIS SITIO-DIRIGIDA Y ELECTROFISIOLOGIA SE DEMOSTRO QUE LA ACCION INDIVIDUAL DE LAS CARGAS NEGATIVAS EXTARCELULARES DEL CANAL KAT1 NO CONSTITUYE EL SENSOR DE HEXT Y QUE EL RESIDUO O RESIDUOS DE KAT1 QUE ACTUEN COMO SENSOR DEL PH EXTRACELULAR DEBERIAN ESTAR SITUADOS EN LA REGION DEL PORO DEL CANAL, MUY CERCA DEL RESIDUO H267. LA DIVERSIDAD FUNCIONAL QUE GENERAN LAS DIFERENCIAS EN LOS MECANISMOS DE ACTIVACION DE LOS CANALES TIPO SHAKER, DETERMINA EL ROL DE ESTAS PROTEINAS EN LA ADAPTACION DE LAS PLANTAS AL AMBIENTE. A TRAVES DE ANALISIS FENOTIPICOS, SE ESTUDIO LOS EFECTOS DE LA PERDIDA DE FUNCION DEL CANAL TIPO SHAKER SKOR EN LA GEMINACION Y EL DESARROLLO DE PLANTAS DE ARABIDOPSIS SOMETIDAS A CONDICIONES DE ESTRES ABIOTICO. SE DETERMINO QUE EL CANAL SKOR ES ESENCIAL PARA GERMINACION DE LAS PLANTAS BAJO CONDICIONES DE ESTRES OSMOTICO. EL CANAL SKOR BAJO ESTAS CONDICIONES PODRIA SER ACTIVADO POR LA UNION DE LA ESPECIE REACTIVA DE OXIGENO H2O2 A UNA DE SUS CISTEINAS (C168). |