| EL TRABAJO INICIAL SE CENTRO EN EL ESTUDIO DE LA EXPRESION DEL GEN QUE CODIFICA PARA INTERLUQUINA-6 (IL-6), BASANDOSE EN ANTECEDENTES DE LA LITERATURA QUE DESCRIBEN QUE EL EJERCICIO PRODUCE UN INCREMENTO EN LA CONCENTRACION PLASMATICA DE ESTA CITOQUINA. ADEMAS, EL GEN DE IL-6 POSEE EN SU PROMOTOR VARIAS SECUENCIAS DE CONSENSO QUE PUEDEN SER MODULADAS POR Ca+2. MEDIANTE TR-PCR SE DEMOSTRO QUE LA DESPOLARIZACION CON K+84mM DE MIOTUBOS DE RATA Y DE CELULAS C2C12, AUMENTA EL NIVEL DE mRNA DE IL-6 CON UNA INDUCCION MAXIMA DE 3,5 VECES ENTRE 3 Y 4 HRS, EFECTO QUE NO DEPENDE DEL Ca+2 EXTRACELULAR. EL TRATAMIENTO DE LAS CELULAS CON BAPTA-AM, QUELANTE INTARCELULAR DE Ca+2 O CON INHIBIDORES DE LA SEÑAL LENTA DE Ca+2, TALES COMO 2APB, XESTOSPONGINA C Y U73122, DISMINUYE LA INDUCCION DE IL-6 EN CELULAS DESPOLARIZADAS. AL DESPOLARIZAR MIOTUBOS TRANSFECTADOS CON UN GEN REPORTERO DE LUCIFERASA QUE CONTIENE UN FRAGMANTO DE 651 BP DEL PROMOTOR DE IL-6, SE OBSERVO UN AUMENTO DE 2 VECES EN LA ACTIVIDAD DEL PROMOTOR EN RELACION A MIOTUBOS NO ESTIMULADOS. ESTE AUMENTO PERSISTE EN MIOTUBOS TRATADOS CON RIANODINA 25�M, PERO DISMINUYE SIGNIFICATIVAMENTE EN PRESENCIA DE 2-APB Y U73122. MUTACIONES EN LOS SITIOS NF-kB Y AP-1, PRESENTES EN EL PROMOTOR DE IL-6, DISMINUYEN LA EXPRESION DEL GEN REPORTERO INDUCIDA POR K+. EN CONJUNTO ESTOS RESULTADOS SUGIEREN LA PARTICIPACION DE LA SEÑAL LENTA DE Ca+2 EN LA ACTIVACION TRANSCRIPCIONAL DE IL-6 EN MIOTUBOS DESPOLARIZADOS CON K+, Y DE NF-kB Y AP-1 COMO ELEMENTOS REGULATORIOS. LA IMPORTANCIA DE ESTE ESTUDIO ES QUE CONSTITUYE EL PRIMER TRABAJO QUE DEMUESTRA DIRECTAMENTE LA PARTICIPACION DE LAS SEÑALES DE Ca+2 INTRACELULAR, MEDIADAS POR IP3R, COMO FACTOR DE SEÑALIZACION DE VIAS QUE LLEVAN A LA EXPRESION DE GENES TARDIOS ESPECIFICOS, TALES COMO IL-6 Y Tnni, EN CELULAS DE MUSCULO ESQUELETICO SOMETIDAS A DESPOLARIZACION. ADEMAS, ESTA TESIS DESTACA PORQUE SE ENCONTRO UN MODELO QUE SE PRESTA MUY BIEN PARA EL ESTUDIO DE LA EXPRESION GENICA MEDIANTE LA TECNICA DE MYCROARRAYS, QUE PERMITE ESTUDIAR EFECTIVAMENTE LA RELACION ENTRE LOS CAMBIO DE POTENCIAL Y LA EXPRESION GENICA EN CELULAS DE MUSCULO ESQUELETICO. LAS CELULAS MUSCULARES CON SOLO UN CAMBIO DE POTENCIAL DE MEMBRANA COMO ESTIMULO, MUESTRAN CAMBIOS CONSISTENTES EN UNA CANTIDAD LIMITADA DE GENES, LO QUE PERMITIRA ESTUDIAR LOS MECANISMOS INVOLUCRADOS EN SU REGULACION. |