| LOS CANALES DE POTASIO ACTIVADOS POR VOLTAJE (KV) SON TETRAMEROS SIMETRICOS FORMADOS POR 4 SUBUNIDADES IDENTICAS. CADA SUBUNIDAD CONSTA DE 6 SEGMENTOS TRANSMEMBRANALES HELICOIDALES (S1-S6), AGRUPADOS EN 2 DOMINIOS FUNCIONALES: EL DOMINIO SENSOR DE VOLTAJE (VSD), FORMADO POR LOS SEGMENTOS S1-S4 Y EL DOMINIO DEL PORO (PD), FORMADO POR LOS SEGMENTOS S5-S6. EL PD DA CUENTA DE LAS PROPIEDADES DE CONDUCCION Y SELECTIVIDAD IONICA, MIENTRAS EL VSD ES EL RESPONSABLE DE LA SENSIBILIDAD AL VOLTAJE QUE MUESTRAN ESTOS CANALES. ANTE UNA DESPOLARIZACION DE LA MEMBRANA, SE PRODUCE UN CAMBIO CONFORMACIONAL EN CADA UNO DE LOS 4 VSD DE LA PROTEINA, QUE POSIBILITA LA APERTURA DE LA VIA DE CONDUCCION IONICA DEL CANAL. ESPECIFICAMENTE EN EL SEGMENTO S4 DE CADA VSD, EXISTEN ENTRE 4 Y 8 RESIDUOS POSITIVOS, TIPICAMENTE ARGININAS MAS EXTERNAS DEL S4: R362, R365, R368 Y R371, DEFINIDAS AQUI COMO R1-R4, ATRAVIESAN COMPLETAMENTE EL CAMPO ELECTRICO TRANSMEMBRANAL, LO QUE DA CUENTA DE LA MAYOR PARTE DE LA SENSIBILIDAD AL VOLTAJE DE LA ACTIVACION. SIN EMBARGO AUN NO EXISTE CONSENSO ACERCA DE LA NATURALEZA Y DIMENSIONES DE ESSE MOVIMIENTO, O DE LA MANERA EN QUE UN SEGMENTO TRANSMEMBRANAL CON TAL DENSIDAD DE CARGAS ES ACOMODADO EN LA MEMBRANA. EN ESTE TRABAJO ABORDE AMBOS PROBLEMAS DETERMINANDO EL EFECTO DEL CONTENIDO DE CARGAS DE S4 SOBRE LA DEPENDENCIA DE VOLTAJE DE LA ACTIVACION DEL CANAL DE POTASIO SHAKER. DEMUESTRO EN ESTA TESIS QUE LA REVERSION DE LA CARGA DE LA CADENA LATERAL DE LA POSICION CORRESPONDIENTE A CADA UNA DE LAS ARGININAS DESDE R1 A R3 REDUCE A LA MITAD LA DEPENDENCIA DE VOLTAJE. DADO QUE CADA REVERSION DE CARGA RESTA DE LAS CARGAS POSITIVAS NOMINALES A CADA SEGMENTO S4 -POR LA ELIMINACION DE UNA CARGA POSITIVA Y LA INTRODUCCION DE UNA CARGA NEGATIVA EN LA MISMA POSICION, LA DISMINUCION A LA MITAD SUGIERE QUE LOS ASPARTATOS UBICADOS EN ESAS POSICIONES CONTRIBUYEN DE IGUAL FORMA QUE LAS ARGININAS ORIGINALES A LA SENSIBILIDAD AL VOLTAJE. LA INTRODUCCION DE CARGAS ADICIONALES EN LAS POSICIONES HIDROFOBAS ENTRE R1 Y R2 PRODUCE UN REMODELAMIENTO DEL CAMPO ELECTRICO TRANMEMBRANAL. DEMOSTRE QUE UNA CADENA LATERAL CARGADA DE CUALQUIER SIGNO EN LA POSICION 363 PRIMERA POSICION ENTRE R1 Y R2 DISMINUYE LA SENSIBILIDAD AL VOLTAJE HASTA EN UN 50 POR CIENTO. MIS RESULTADOS INDICAN QUE LA CARGA INTRODUCIDA PROVOCA UN DESPLAZAMIENTO, HACIA ADENTRO, DEL BORDE EXTERNO DEL CAMPO ELECTRICO, DEJANDO A R1 Y A LA CADENA LATERAL CARGADA ADICIONADA PERMANENTEMENTE EXPUESTAS AL SOLVENTE EXTRACELULAR Y POR TANTO NO PARTICIPAN EN LA SENSIBILIDAD AL VOLTAJE. LA PRESENCIA DE ASPARTATO EN CADA UNA DE LAS 2 POSICIONES HIDROFOBAS UBICADAS ENTRE R2 Y R3 NO TIENE EFECTO EN LA DEPENDENCIA DE VOLTAJE. SI EL S4 EXPERIMENTARA UNA TRASLACION DE GRANDES DIMENSIONES A TRAVES DEL CAMPO ELECTRICO DURANTE LA ACTIVACION, COMO LA TRASLACION DE 15 A DESCRITA EN EL MOELO DE LA PALETA, UNA CARGA EN CUALQUIERA DE ESAS POSICIONES CONTRIBUIRIA A LA SENSIBILIDAD AL VOLTAJE. POR TANTO, ESTOS RESULTADOS SON INCOMPATIBLES EL MODELO DE LA PALETA. |