| UNA INYECCION DE ESTRADIOL (E2) DADA ANTES DEL COITO, ACELERA EL TRANSPORTE OVULAR (TO) EN EL OVIDUCTO DE LA RATA A TRAVES DE VIAS NO GENOMICAS QUE INVOLUCRAN AMPC, IP3 Y PROTEINAS QUINASAS, PERO DADA DESPUES DEL COITO LO HACE A TRAVES DE VIAS GENOMICAS (BIOLOGY OF REPRODUCTION. 2003; 68(4):1225-1231). A ESTE CAMBIO EN LAS VIAS DE SEÑALIZACION INDUCIDAS POR EL COITO LO HEMOS DENOMINADO VIRAJE CELULAR Y PUEDE SER GATILLADO EN COMPLETA AUSENCIA DEL MACHO POR LA ESTIMULACION MECANICA DEL AREA GENITAL (BIOLOGICAL RESEARCH. 2007; 40(2): 213-222) O POR INSEMINACION ARTIFICIAL (REPRODUCTION. 2003; 125(5): 677-682). EL PRIMER OBJETIVO DE ESTA TESIS FUE CARACTERIZAR LAS VIAS GENOMICAS Y NO GENOMICAS QUE RESPONDEN A E2 EN LAS RATAS APAREADAS Y NO APAREADAS. E2 INCREMENTO LOS NIVELES DE AMPC EN EL OVIDUCTO ANTES, PERO NO DESPUES DEL APAREAMIENTO. MAS AUN, EL ACTIVADOR DE LA ADENILIL CICLASA, FORSKOLINA, Y EL ANALOGO DE AMPC, DIBUTIRIL AMPC, ACELERARON EL TO SOLO EN RATAS NO APAREADAS, INDICANDO QUE SEÑALES ASOCIADAS AL COITO INACTIVAN LA VIA NO GENOMICA DEL E2 RIO ARRIBA Y RIO ABAJO DE LA PRODUCCION DE AMPC. EL PATRON DE EXPRESION GENICA INDUCIDO POR E2 EN EL OVIDUCTO FUE DIFERENTE EN RATAS APAREADAS Y NO APAREADAS. E2 INCREMENTO LOS NIVELES DE 40 TRANSCRITOS COMUNES A AMBAS CONDICIONES, E.G. RECEPTOR DE PROGESTERONA Y CREATINA QUINASA CEREBRAL, INDICANDO QUE UNA VIA GENOMICA CLASICA QUE RESPONDE A E2 OPERA EN RATAS APAREADAS Y NO APAREADAS. E2 INCREMENTO LA EXPRESION DE OTROS 36 GENES EN RATAS NO APAREADAS, LOS CUALES NO CAMBIARON SUS NIVELES DE EXPRESION EN RESPUESTA A E2 DESPUES DEL COITO. EL TRANSCRITO DEL GEN QUE CODIFICA PARA LA PROTEINA REGULADORA DE LA ESTEROIDOGENESIS AGUDA (STAR) ES UNO DE ELLOS Y SU INCREMENTO FUE SUPRIMIDO POR EL ANTAGONISTA DEL RECEPTOR DE E2, ICI 182780 Y POR EL INHIBIDOR DE LA ADENILIL CICLASA SQ 22536. SOLAMENTE DOS GENES, ADENOSINA MONOFOSFATO DEAMINASA 3 (AMPD3) Y CALBINDINA-D9K (CALB-D9K), INCREMENTARON SUS NIVELES DE ARNM EN RESPUESTA A E2 EXCLUSIVAMENTE EN RATAS APAREADAS. LA INYECCION LOCAL DE UN MORFOLINO DIRIGIDO CONTRA LA SECUENCIA DE CALB-D9K DE RATA, EL CUAL INHIBE EL INCREMENTO DE LA EXPRESION PROTEICA DE CALB-D9K INDUCIDO POR E2, IMPIDIO PARCIALMENTE AL E2 ACELERAR EL TO EN RATAS APAREADAS, PERO NO TUVO EFECTO ANTES DEL COITO. UN ANALISIS POR MICROARREGLOS DE LA EXPRESION GENICA DE OVIDUCTOS DE RATAS APAREADAS Y NO APAREADAS A TIEMPOS EQUIVALENTES A 6 HORAS POST-COITO, IDENTIFICO 17 GENES CUYA EXPRESION SE INCREMENTO O DISMINUYO POR EL COITO. EL NIVEL DEL TRANSCRITO QUE CODIFICA PARA LA ENZIMA CATECOL-O-METILTRANSFERASA (COMT), LA CUAL PRODUCE METOXIESTRADIOLES A PARTIR DE HIDROXIESTRADIOLES, DISMINUYO 6 VECES Y ESTO FUE CONFIRMADO POR PCR EN TIEMPO REAL. LAño-METILACION OF 2-HIDROXIESTRADIOL FUE 4 ORDENES DE MAGNITUD MAYOR EN EXTRACTOS PROTEICOS OVIDUCTUALES DE RATAS NO APAREADAS QUE DE RATAS APAREADAS. EL EFECTO DE 2ME EN EL TO FUE BLOQUEADO POR LA ADMISNISTRACION LOCAL DEL INHIBIDOR DE PROTEINAS QUINASAS H-89 Y POR ICI 182780, PERO NO POR EL INHIBIDOR DE COMT OR486 O POR ACTINOMICINA D. EN CONCLUSION, UNA VIA NO GENOMICA, ACTIVADA POR METABOLITOS DE E2 GENERADOS POR COMT, MEDIA EL EFECTO DE E2 EN EL TO Y UNA VIA GENOMICA CLASICA DE E2, NO INVOLUCRADA EN EL EFECTO CINETICO DE E2, OPERA SIMULTANEAMENTE EN EL OVIDUCTO ANTES DEL COITO. SEÑALES ASOCIADAS AL COITO INACTIVAN LA VIA NO GENOMICA DEL E2, RIO ARRIBA Y RIO ABAJO DE 2ME Y RIO ARRIBA Y RIO ABAJO DE LA PRODUCCION DE AMPC, PERMITIENDO EL AUMENTO EN LA EXPRESION DE GENES INVOLUCRADOS EN EL TRANSPORTE OVULAR ACELERADO INDUCIDO POR E2. LAS SEÑALES ESPECIFICAS QUE GATILLAN EL VIRAJE CELULAR AUN SE DESCONOCEN. |