TOXICIDAD DEL TELURITO DE POTASIO (K2TEO3) EN ESCHERICHIA COLI: UN DAÑO DE TIPO OXIDATIVO.
Autor IVAN LUIS CALDERON LIZANA
Profesor guía CLAUDIO VASQUEZ
Para optar al grado de DOCTOR EN MICROBIOLOGIA. Institución UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE CHILE/FACULTAD DE QUIMICA Y BIOLOGIA.
Lugar SANTIAGO, CHILE Año 2008
Páginas 89p.
Disciplina MICROBIOLOGIA. Colección TESIS
Ubicación TESIS/0757D
Resumen
EL TELURITO DE POTASIO (K2TEO3) ES TOXICO PARA LA MAYORIA DE LOS SERES VIVOS Y LAS RAZONES BIOQUIMICAS DE SU TOXICIDAD SON HASTA AHORA DESCONOCIDAS. EL PRESENTE TRABAJO SE CENTRO EN ESTE PROBLEMA UTILIZANDO ESCHERICHIA COLI COMO MODELO EXPERIMENTAL. SE OBSERVO QUE AL CERECER ESTAS CELULAS EN PRESENCIA DE K2TEO3, LA REDUCCION INTRACELULAR DEL OXIANION A SU FORMA ELEMENTAL (TE0) GENERA UNA RESPUESTA ANTIOXIDANTE GENERALIZADA, EN QUE ACTIVIDADES ENZIMATICAS COMO SUPEROXIDO DISMUTASA (SOD) Y CATALASA (CAT) ESTAN CLARAMENTE INDUCIDAS A TIEMPOS TEMPRANOS DE TRATAMIENTO. DEL MISMO MODO, SE OBSERVO LA INDUCCION DE LA EXPRESION DE CONOCIDOS MARCADORES DE ESTRES OXIDATIVO COMO SOXS, SODA, FUMC Y SUFS. ADEMAS, UTILIZANDO LA SONDA DIHIDROETIDINA (DHE) SE DETECTO ESPECIFICAMENTE LA PRODUCCION DE SUPEROXIDO (O2-) EN CELULAS CRECIDAS EN PRESENCIA DE TEO3-2. POR OTRA PARTE, A PARTIR DE EXTRACTOS CRUDOS DE CELULAS TRATADAS CON TEO32- SE ENSAYO LAS ENZIMAS FUMARASA A (FUMA) Y ACONITASA B (ACNB), PARTICULARMENTE SENSIBLES A ESTRES OXIDATIVO. LOS RESULTADOS OBTENIDOS CON CELULAS CRECIDAS AEROBICAMENTE EN PRESENCIA DEL OTICO DEMUESTRAN UNA PERDIDA DE MAS DE 90 POR CIENTO DE ESTAS ACTIVIDADES RESPECTO AL CONTROL SIN TRATAMIENTO. INTERESANTEMENTE NO SE OBSERVA EL MISO EFECTO PARA CELULAS CRECIDAS EN PRESENCIA DE K2TEO3 EN ANAEROBIOSIS. UN ANALISIS DE ESPECTROSCOPIA DE RESONANCIA PARAMAGNETICA (EPR) DE UNA FRACCION PURIFICADA DE FUMARASA A DE E. COLI EXPUESTA A UN SISTEMA REDUCTOR DE TEO32- IN VITRO, MOSTRO LA SEÑAL CARACTERISTICA DE UN CENTRO CATALITICO DE TIPO [4FE-4S] INACTIVADO OXIDATIVAMENTE. MEDIANTE ENSAYOS ESPECTROSCOPICOS CON QUELANTES ESPECIFICOS DE FE2+ SE COMPROBO LA LIBERACION DE ION FERROSO DESDE LA FRACCION PURIFICADA DE FUMA EXPUESTA AL SISTEMA REDUCTOR DE TELURITO, DEMOSTRANDO QUE ESTE TOXICO ES CAPAZ DE INACTIVAR ESTE TIPO DE ENZIMAS POR OXIDACION DE SU CENTRO CATALITICO CON LA CONSECUENTE PERDIDA DE FE2+ Y DESINTEGRACION DEL GRUPO PROSTETICO. LOS RESULTADOS OBTENIDOS PERMITIERON CONCLUIR QUE LA TOXICIDAD DEL K2TEO3 EN E. COLI DICE RELACION CON EL ESTABLECIMIENTO DE UN ESTRES DE TIPO OXIDATIVO.