| EN EL REMODELADO CARDIACO PATOLOGICO, LOS FIBROBLASTOS EXPERIMENTAN HIPERPLASIA, AUMENTAN LA SINTESIS DE PROTEINAS DE LA MATRIZ EXTRACELULAR Y SE DIFERENCIAN A MIOFIBROBLASTOS POR MEDIO DE LA ACCION CONCERTADA DEL TGFBETA1, EL FRAGMENTO DE FIBRONECTINA ED-A Y TENSION MECANICA. EL MIOFIBROBLASTO PRESENTA ALFA-ACTINA DE MUSCULO LISO Y ADHESIONES FOCALES DE MAYOR TAMAÑO. LAS CARACTERISTICAS ESTRUCTURALES Y FUNCIONALES DE LOS FIBROBLASTOS Y MIOFIBROBLASTOS, HACE SUPONER LA IMPORTANTE PARTICIPACION DE PROTEINAS G PEQUEÑAS DE LA FAMILIA RHO. DE ESTE GRUPO DE PROTEINAS, RHOA, RAC1 Y CDC42 HAN SIDO LAS MAS ESTUDIADAS, SIENDO RHOA RESPONSABLE DE LA FORMACION DE LA S FIBRAS DE ESTRES Y ADHESIONES FOCALES PRESENTES EN FIBROBLASTOS Y EN MIOFIBROBLASTOS. TODAS LAS PROTEINAS G PEQUEÑAS OSCILAN ENTRE UN ESTADO INACTIVO Y ACTIVO, DEPENDIENDO SI TIENEN UNIDO GDP O GTP. ADEMAS, SU ACTIVACION DEPENDE DE SU ASOCIACION A LA MEMBRANA CELULAR, MEDIANTE FARNESILPIROFOSFATO (FPP) O GERANILGERANILPIROFOSFATO (GGPP). TANTO EL GGPP COMO EL FPP, SE SINTETIZAN POR LA VIA DEL COLESTEROL Y POR LO TANTO, CUALQUIER INTERVENCION DE SU SINTESIS RESULTARA EN UNA PERDIDA DE LA FUNCIONALIDAD DE ESTAS PROTEINAS. LAS ESTATINAS SON FARMACOS QUE INHIBEN LA ENZIMA MARCAPASO DE LA SINTESIS DEL COLESTEROL, POR LO TANTO, SU UTILIDAD TERAPEUTICA INICIAL Y PRINCIPAL FUERON SUS EFECTOS HIPOLIPEMIANTES. SIN EMBARGO, LAS ESTATINAS POSEEN OTROS EFECTOS FAMACOLOGICOS AL DISMINUIR LA FORMACION DE INTERMEDIARIOS ISOPRENOIDES TALES COMO FPP Y GGPP. DATOS DE LA LITERATURA MUESTRAN QUE LAS ESTATINAS PUEDEN INDUCIR PERDIDA DE LA ESTRUCTURA CELULAR Y MUERTE POR APOPTOSIS EN DIVERSOS TIPOS CELULARES POR MECANISMOS DEPENDIENTES DE LOS INTERMEDIARIOS DE LA SINTESIS DEL COLESTEROL. A LA FECHA, SE DESCONOCEN LOS EFECTOS DE LAS ESTATINAS SOBRE LA VIABILIDAD DE FIBROBLASTOS Y MIOFIBROBLASTOS COMO TAMBIEN SOBRE LA ESTRUCTURA Y COMPORTAMIENTO DE ESTAS CELULAS. PARA RESPONDER A ESTAS INTERROGANTES SE PLANTEARON LAS SIGUIENTES HIPOTESIS: A) ESTATINAS INDUCEN UNA MUERTE DIFERENCIAL EN MIOFIBROBLASTOS Y FIBROBLASTOS CARDIACOS. B) MAYORES NIVELES DE RHOA ACTIVO EN EL MIOFIBROBLASTO CARDIACO CONFIEREN MAYOR RESISTENCIA A LA MUERTE RESPECTO DE FIBROBLASTO CARDIACO. LOS OBJETIVOS ESPECIFICOS PROPUESTOS FUERON: * INVESTIGAR SI LAS ESTATINAS ESTIMULAN IN VITRO LA MUERTE DEL FIBROBLASTO Y MIOFIBROBLASTO CARDIACO. * ESTUDIAR SI LAS ESTATINAS INHIBEN RHOA EN FIBROBLASTOS Y MIOFIBROBLASTOS CARDIACOS EN CULTIVO * ESTUDIAR LA PARTICIPACION DE LA VIA RHOA EN LA MUERTE INDUCIDA POR ESTATINAS. EL MODELO EXPERIMENTAL FUE FIBROBLASTOS Y MIOFIBROBLASTOS CARDIACOS DE RATAS NEONATAS EN PASAJE 2. LOS EXPERIMENTOS SE REALIZARON EN CONDICIONES PRIVADAS DE SUERO POR 24 H. LUEGO, LAS CELULAS, SE TRATARON CON SIMVASTATINA EN CONCENTRACIONES SIMILARES A LAS ENCONTRADAS EN PLASMA DE PACIENTES QUE UTILIZAN EN ESTE FARMACO: 0.1;1 Y 10 UM. LOS RESULTADOS MUESTRAN QUE SIMVASTATINA INDUCE UNA PERDIDA DE VIABILIDAD E INDUCCION DE APOPTOSIS EN FORMA DEPENDIENTE DE LA CONCENTRACION Y EL TIEMPO, TANTO EN FIBROBLASTOS A PARTIR DE LAS 24 H COMO EN MIOFIBROBLASTOS LOS CUALES MANIFIESTAN ESTA CONDICION A PARTIR DE LAS 48 H. ADEMAS LA PERDIDA DE VIABILIDAD Y APOPTOSIS ES DE MAYOR MAGNITUD EN FIBROBLASTOS. LA CARACTERIZACION DE LA APOPTOSIS, MOSTRO NO ESTAR ASOCIADO A UNA CAIDA DEL POTENCIAL MITOCONDRIAL NI CAMBIOS EN LOS NIELES DE ATP. ADEMAS, SE OBSERVO PROCESAMIENTO DE PROCASPASA-3 Y EL USO DEL INHIBIDOR GENERAL DE CASPASAS ZVAD-FMK PREVINO LA INDUCCION DE APOPTOSIS, INDICANDO QUE LA INDUCCION DE MUERTE CELULAR ES DEPENDIENTE DE CASPASAS. AL EVALUAR LA PARTICIPACION DE LOS INTERMEDIARIOS DE LA SINTESIS DEL COLESTEROL, SE ENCONTRO QUE MEVALONATO, GERANILGERANIL PIROFOSFATO Y FARNESIL PIROFOSFATO, PERO NO ESCUALENO, PREVENIAN LA INDUCCION DE APOPTOSIS POR SIMVASTALINA, INDICANDO QUE LA DEPLECION DEL LOS NIVELES DEL COLESTEROL NO ES RESPONSABLE DE DICHO FENOMENO. POR OTRA PARTE, SE OBSERVO MAYORES NIVELES DE RHOA EN MIOFIBROBLASTOS RESPECTO A FIBROBLASTOS. ADEMAS, EL USO DE INHIBIDORES DE LA TRASNFERASAS DE GERANILGERANIL Y TRANSFERSA DE FARNESIL, PERMITIERON DEMOSTRAR QUE LA PRENILACION DE PROTEINAS DE LA FAMILIA RHO, PERO NO RAS, ES DETERMINANTE EN SOSTENER LA VIABILIDAD DE AMBOS TIPOS CELULARES. EN FORMA SIMILAR, EL USO DE LA TOXINA C3 EXOTRANSFERASA, UN INHIBIDOR DE RHOA, RHOB Y RHOC, INDUJO PERDIDA DE VIABILIDAD Y APOPTOSIS EN FIBROBLASTOS Y MIOFIBROBLASTOS, AUNQUE EN ESTE ULTIMO FUE DE MENOR MAGNITUD. SIN EMBARGO, EL USO DE UN DOMINANTE ACTIVO DE RHOA, NO PERMITIO PREVENIR LOS EFECTOS DE SIMVASTATINA. INDICANDO QUE RHOA POR SI MISMO NO ES SUFICIENTE PARA SOSTENER LA VIABILIDAD. ADEMAS, SE ESTUDIO EL EFECTO DE SIMVASTATINA EN LA MORFOLOGIA CELULAR DE FIBROBLASTOS CARDIACOS DONDE SE OBSERVO QUE ESTE FARMACO INDUCE UN DESORDEN TANTO DEL CITOESQUELTO DEACTINA COMO TAMBIEN DE LAS ADHESIONES FOCALES. EN EL MISMO SENTIDO UTILIZANDO ANGIOTENSINA II, SE PUDO OBSERVAR LA ACTIVACION DE LAS ADHESIONES FOCALES POR FOSFORILACION DE PAXILINA, SIENDO ESTE ULTIMO EFECTO IMPEDIDO POR SIMVASTATINA. EN FORMA SIMILAR A LOS RESULTADOS ANTERIORES, TODOS ESTOS EFECTOS FUERON DEPENDIENTES DE LOS INTERMEDIARIOS DE LA SINTESIS DEL COLESTEROL. ADEMAS SE OBSERVO UN DETERIORO EN EL COMPORTAMIENTO CELULAR DE FIBROBLASTOS EN CUANTO A SU CAPACIDAD DE MIGRAR Y ADHERIRSE, LOS CUALES FUERON PREVENIDOS POR LA PRESENCIA DE INTERMEDIARIOS DE LA SINTESIS DE COLESTEROL E INDEPENDIENTES DE LA SINTESIS DE ESTE ULTIMO. DE UN PUNTO DE VISTA FISIOPATOLOGICO, LA REPARACION TISULAR POSTERIOR A UN INFARTO DADA POR FIBROBLASTOS Y MIOFIBROBLASTOS, SE ACOMPAÑA DE PROCESOS DE FIBROSIS Y MEDIANTE ESTA DISFUNCION VENTRICULAR. EN ESTE SENTIDO, LOS RIESGOS DE SUFRIR INFARTOS ESTAN DADOS POR FACTORES DE RIESGO SIENDO, ENTRE OTROS, LOS ALTOS NIVELES DE COLESTEROL PLASMATICO. EN ESTE CONTEXTO, LAS ESTATINAS PRESENTAN BENEFICIOS CONOCIDOS POR SUS EFECTOS HIPOLIPEMIANTES Y EN SEGUNDO TERMINO, LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN EL DESARROLLO DE ESTA TESIS SUGIEREN, QUE LAS ESTATINAS PUEDEN DISMINUIR LA VIABILIDAD DE FIBROBLATOS Y MIOFIBROBLASTOS ASOCIADO POSIBLEMENTE A UNA DISMINUCION DE LA FIBROSIS CARDIACA. |