| LA FUNCION ENDOTELIAL, MEDIDA COMO REACTIVIDAD VASCULAR DEPENDIENTE DE FLUJO, ESTA DETERMINADA PRINCIPALMENTE POR LA ACTIVIDAD VASO-CONTRICTORA DE LA ENDOTELINA 1 (ET-1). LA PERDIDA DE LA FUNCION ENDOTELIAL ESTA ASOCIADA A LA HIPERCOLESTEROLEMIA, PERO TAMBIEN A CADA UNO DE LOS FACTORES DE RIESGO CARDIOVASCULAR RECONOCIDOS. EL CONSUMO DE VEGETALES Y DE VINO EN FORMA MODERADA, FUENTE DE ANTIOXIDANTES FENOLICOS, SE ASOCIA A UN AUMENTO DE LA FUNCION ENDOTELIAL Y CONTRIBUIRIA A UN MENOR RIESGO CARDIOVASCULAR RECONOCIDOS. EL CONSUMO DE VEGETALES Y VINO EN FORMA MODERADA, FUENTE DE ANTIOXIDANTES FENOLICOS, SE ASOCIA A UN AUMENTO DE LA FUNCION ENDOTELIAL Y CONTRIBUIRIA A UN MENOR RIESGO DE ENFERMEDAD CARDIOVASCULAR. EL MECANISMO QUE EXPLICA ESTE EFECTO DE LOS COMPUESTOS FENOLICOS NO ESTA CLARAMENTE ESTABLECIDO, PERO PODRIA ESTAR RELACIONADO CON PROTECCION DE DAÑO OXIDATIVO A LAS LIPOPROTEINAS, A LAS CELULAS, A LAS CELULAS ENDOTELIALES Y AL NO PRODUCIDO. LA HIPOTESIS DE TRABAJO ES QUE LOS COMPUESTOS FENOLICOS RESTABLECEN DE LA DISFUNCION ENDOTELIAL PRODUCIDA POR LDL, INFLUYENDO SOBRE LA SINTESIS Y ACTIVIDAD DE FACTORES PROMOTORES EN LA CELULA ENDOTELIAL. EN ESTE PROCESO PARTICIPAN RECEPTORES DE LIPOPROTEINAS QUE ACTUAN COMO TRANSDUCTORES DEL ESTADO REDOX DE LAS LIPOPROTEINAS PLASMATICAS. EL OBJETIVO GENERAL DE ESTA TESISI FUE ESTUDIAR LOS MECANISMOS MOLECULAES QUE EXPLICAN LA PERDIDA DE LA FUNCION ENDOTELIAL POR SOBRECARGA LIPIDICA Y SU RESTABLECIMIENTO MEDIANTE SUPLEMENTACION CON COMPUESTOS FENOLICOS. LA HIPOTESIS PLANTEA QUE 1) LOS COMPUESTOS FENOLICOS AFECTAN LA EXPRESION DE FACTORES VASOMOTORES REGULADOS POR LDL Y 2) RECEPTORES DE LIPOPROTEINAS PARTICIPAN EN EL PROCESO DE MANTENCION DE LA FUNCION ENDOTELIAL POR ANTIOXIDANTES. EXPERIMENTALMENTE, SE UTILIZARON CULTIVOS PRIMARIOS DE CELULAS ENDOTELIALES, DONDE EL EFECTO DE LA SOBRECARGA LIPIDICA FUE AVALUADO MEDIANTE LA INCUBACION CON LIPOPROTEINAS NATIVAS Y OXIDADAS. EN ESTE MODELO SE ESTUDIO LA MODIFICACION DE LA EXPRESION DE ET-1 Y DE LA EXPRESION Y ACTIVIDAD DE LA ENZIMAñoXIDO NITRICO SINTASA ENDOTELIAL (ENOS), RESPONSABLE DE LA SINTESIS DE NO. EL EFECTO DE ANTIOXIDANTES FENOLICOS SOBRE ESTOS GENES Y EL PAPEL DEL ESTRES OXIDATIVO FUE EVALUADO. EN UNA SEGUNDA ETAPA, PARA ESTUDIAR LA PARTICIPACION DE RECEPTORES DE LIPOPROTEINAS EN LA MODIFICACION DE LA EXPRESION GENICA DE LA CELULA ENDOTELIAL, SE EVALUO ESPECIFICAMENTE EL PAPEL DEL RECEPTOR DE HDL (SR-BI), TANTO EN CELULAS ENDOTELIALES COMO EN UN MODELO DE TRANSFECCION ESTABLE DEL RECEPTOR EN LA LINEA CELULAR LDLA7. POR ESTO LOS RESULTADOS FUERON DIVIDIDOS EN DOS SECCIONES: 1) FUNCION ENDOTELIAL: SE ENCONTRO QUE LAS LIPOPROTEINAS INDUCEN LA SECRECION ENDOTELIAL DE ET-1 E INHIBEN LA ACTIVIDAD DE LA ENOS. LOS COMPUESTOS FENOLICOS INHIBEN LA SECRECION DE ET-1 EN CONDICIONES BASALES E INDUCIDA POR LIPOPROTEINAS. LOS COMPUESTOS FENOLICOS TIENEN UN EFECTO DUAL SOBRE LA ENOS: INDUCEN SU TRANSCRIPCION Y SU EXPRESION Y SIN EMBARGO INHIBEN SU ACTIVIDAD. LA PRESENCIA DE LIPOPROTEINAS POTENCIA ESTA INHIBICION. LOS EFECTOS DE LOS COMPUESTOS FENOLICOS SOBRE LA CELULA ENDOTELIAL ESTARIAN, AL MENOS EN PARTE, DETERMINADOS POR LA PROTECCIN ANTE EL ESTRES OXIDATIVO GENERADO POR LAS LIPOPROTEINAS, LO QUE SE EVIDENCIO COMO UNA INHIBICION DE LA ACTIVACION DE NF-KB Y DE LA MODIFICACION DE PROTEINAS POR PRODUCTOS DE LA DEGRADACION OXIDATIVA DEL NO. 2) INTERACCION ENTRE CELULA ENDOTELIAL Y LIPOPROTEINAS: SE ENCONTRO QUE EL RECEPTOR SR-BI SE EXPRESA EN CELULAS ENDOTELIALES Y QUE SU EXPRESION ES REGULADA POR LIPOPROTEINAS OXIDADAS Y CAMBIOS REDOX EN GENERAL. LA EXPRESION DE SR-BI ESTA ASOCIADA A PROTECCION CELULAR FRENTE AL ESTRES OXIDATIVO POR UN MECANISMO QUE PODRIA DEPENDER DE LA INTERNALIZACION DE VITAMINA E DESDE LAS HDL. ESTO ES SUGERIDO PORQUE LAS CELULAS QUE SOBRE EXPRESAN EL RECEPTOR TIENEN MAYOR CONTENIDO BASAL DE VITAMINA E, PORQUE CAPTAN SIGNIFICATIVAMENTE MAS VITAMINA E DESDE LAS HDL Y PROQUE LA VITAMINA E INHIBE LA EXPRESION DE SR- BI EN CELULAS ENDOTELIALES. EN CONJUNTO LOS RESULTADOS MUESTRAN QUE LAS LIPOTROTEINAS LLEVAN A LA PERDIDA DE LA FUNCION ENDOTELIAL, AL INDUCIR LA SECRECION DE ET- 1 POR UN MECANISMO QUE DEPENDE, AL MENOS EN PARTE, DE LA GENERACION DE ESTRES OXIDATIVO. LOS COMPUESTOS FENOLICOS RESTABLECERIAN LA FUNCION ENDOTELIAL AL INHIBIR LA SECRECION DE ET-1 POR UN MECANISMO QUE DEPENDE, AL MENOS EN PARTE, DE LA GENERACION DE ESTRES OXIDATIVO. LOS COMPUESTOS FENOLICOS RESTABLECERIAN LA FUNCION ENDOTELIAL AL INHIBIR LA SECRECION DE ET-1 Y LA DEGRADACION OXIDATIVA DE NO. LAS LIPOPROTEINAS MODIFICAN EL ESTADO REDOX DE LA CELULA ENDOTELIAL EN UN PROCESO EN QUE PARTICIPA EL RECEPTOR SR-BI, EL CUAL AL SER INDUCIDO POR ESTRES OXIDATIVO, LLEVARIA A UNA PROTECCION AL DAÑO OXIDATIVO DE LA CELULA ENDOTELIAL POR AUMENTO DE LA CAPTACION DE VITAMINA E. LOS RESULTADOS MUESTRAN POR PRIMERA VEZ UN PAPEL FUNDAMENTAL DE ET-1 EN LA MANTENCION DE LA FUNCION ENDOTELIAL POR COMPUESTOS FENOLICOS Y PERMITEN POSTULAR UN NUEVO MECANISMO ATEROPROTECTOR PARA EL RECEPTOR SR-BI EN LA VASCULATURA. |