En este segundo año se continuará con el estudio comparativo del proceso de ablandamiento en Fragaria x ananassa y Fragaria chiloensis propuesto originalmente en el proyecto. Durante el primer año de colaboración se trabajó en la determinación de actividad enzimática de diversas enzimas que degradan pared celular y en la obtención de patrones de expresión de ciertos genes relacionados con la degradación de la pared celular de frutillas.

Las tareas a desarrollar durante la estadía de Marcela Dotto en la Universidad de Talca estarán directamente relacionadas con el análisis de la expresión de distintas expansinas (FaExp1, FaExp2,FaExp4,FaExp5 y FaExp6) en Fragaria chiloensis.

1. Obtención de muestras. Se trabajará con frutos de Fragaria chiloensis y Fragaria x ananassa cv. Chandler en diferentes estaíos de crecimiento y desarrollo: Verde pequeño (VP), verde grande (VG), turning (T) y maduro (M).

2. Análisis de la expresión de genes. Se extraerá ARN total de cada una de las muestras. Se medirá el contenido de ARN total a través de Nanodrop y se analizará su integridad mediante electroforesis en geles desnaturalizantes de azarosa-formaldehido.

En el laboratorio del grupo argentino se han clonado genes que codifican para expansinas (FaExp1, FaExp2,FaExp4,FaExp5 y FaExp6). Estos clones serán utilizados para analizar mediante Northern-blot la expresión de los genes respectivos durnate la maduración de las diferentes variedades de frutilla. Se emplearán sondas marcadas radioactivamente.

Una vez finalizada la tarea experimental, se completará el análisis de los datos y se procederá a la redacción de trabajos científicos para su publicación.